Hemolyse/fr: verschil tussen versies
(Nieuwe pagina aangemaakt met 'Pour les échantillons qui ne passent pas par l’appareil biochimique, l’indice H n’est pas calculé et par conséquence l’hémolyse n’est pas indiquée au...') |
|||
| Regel 56: | Regel 56: | ||
Pour les échantillons qui ne passent pas par l’appareil biochimique, l’indice H n’est pas calculé et par conséquence l’hémolyse n’est pas indiquée automatiquement. | Pour les échantillons qui ne passent pas par l’appareil biochimique, l’indice H n’est pas calculé et par conséquence l’hémolyse n’est pas indiquée automatiquement. | ||
| − | + | Une différence entre [[MCHC/fr|MCHC]] et [[CHCM/fr|CHCM]] de >1,9 g/dL dans un échantillon sanguin à l’[[EDTA/fr|EDTA]] est une indication de lipémie ou d’hémolyse. D’ou l’intérêt de vous donner les deux paramètres. | |
==Kan men voor hemolyse corrigeren== | ==Kan men voor hemolyse corrigeren== | ||
Versie van 15 dec 2014 om 19:36
Inhoud
Définition
C’est la libération de constituants des globules sanguins dans le sérum ou plasma sanguin.
C’est visible après centrifugation par la coloration rosée à rouge du sérum ou plasma sanguin due à l’hémoglobine provenant des globules rouges. L’hémolyse affecte un grand nombre d’analyses.
De toutes les formes d'interférence l'hemolyse influence le plus grand nombre de paramètres.[1]
|
|
|
| H-Index: L=12 R=23, aucun | H-Index: L=12 R=94, faible | H-Index: L=12 R=420, fort |
Mécanisme d’interférence
L’hémolyse peut causer aussi bien l’augmentation que la diminution du paramètre analysé.
Fuite de substances intracellulaires
Des substances érythrocytaires peuvent fortement influencer la concentration dans le sérum/plasma.
Interférence optique
Le spectre d’absorption d’hémoglobine montre son maximum à une longueur d’onde de 415 nm et entre 540 et 570 nm. L’augmentation ou diminution observée d’un résultat dépend de la méthode (longueur d’onde) par laquelle le paramètre est mesuré et sa concentration. Ceci se produit avec:
Interférence chimique, biochimique et immunologique
Des composants intracellulaires peuvent interférer avec la réaction de mesurage. Exemples sont :
- Fructosamine : faussement augmenté si on utilise la méthode NBT. [2]
- CK est faussement augmenté. [3]
- Bilirubine: l’effet peroxydatif suite à l’auto-oxydation d’hémoglobine casse la liaison diazobilirubine responsable de la réaction colorimétrique par laquelle le mesurage de bilirubine est légèrement ou fortement diminué. Ceci dépend de la composition du réactif diazo.[4]
Comment l’hémolyse est-elle détectée
A partir d’une concentration de 300 mg/L (0,3 g/L) d’hémoglobine l’hémolyse est visible à l’œil nu.
A chaque passage de l’échantillon dans l’analyseur biochimique une mesure bichromatique d’absorbance est effectuée dans l’échantillon après dilution avec de l’eau physiologique. Après mesurage à une longueur d’onde de 570 et de 600 nm, éventuellement corrigé par lipémie, un index d’hémolyse est calculé. Pour chaque paramètre effectué par l’instrument Il y a un indice H maximum défini pour lequel le mesurage est encore fiable. En cas de dépassement le résultat sera indiqué comme inexécutable.
Un tableau avec les indices H, L et I est consultable ici pour les méthodes appliquées par notre laboratoire pour un grand nombre de déterminations biochimiques.
Pour les échantillons qui ne passent pas par l’appareil biochimique, l’indice H n’est pas calculé et par conséquence l’hémolyse n’est pas indiquée automatiquement.
Une différence entre MCHC et CHCM de >1,9 g/dL dans un échantillon sanguin à l’EDTA est une indication de lipémie ou d’hémolyse. D’ou l’intérêt de vous donner les deux paramètres.
Kan men voor hemolyse corrigeren
Ja en nee. Voor efflux van intracellulaire bestanddelen of chemische interferentie kan men uiteraard niet corrigeren. Men kan immers niet weten welk aandeel er in het serum of plasma aanwezig was en hoeveel er uit de cellen is uitgetreden. Optische interferentie wordt tot op zeker hoogte gecompenseerd door een tweede meting uit te voeren van het reactiemengsel maar op een andere golflengte die niet beïnvloed wordt door de reactie zelf. Deze procedure wordt sample blanking of kortweg blanking genoemd.
Hoe hemolyse voorkomen
- Vermijd moeilijke bloedafname en meervoudige punctie. Desgevallend wordt ook vloeistof uit het omgevend weefsel mee opgezogen. Dit veroorzaakt thrombocytenaggregatie, verhoging van kalium en in erge gevallen een vervroegde stolling.
- Vermijd overdreven onderdruk. Dit beschadigt de opgezogen cellen en doet bloedvaten collaberen.
- Indien niet via een vacuumsysteem gewerkt wordt, haal de naald van de spuit bij het vullen van de tubes.
- Laat het bloed voorzichtig langs de rand van de tube lopen.
- Alle tubes (ook serumtubes!) dienen goed maar voorzichtig gemengd te worden door ze minimaal 5 maal volledig te zwenken. Niet of te zwak mengen veroorzaakt stolsels, schudden veroorzaakt hemolyse.
- Afcentrifugeren en scheiden van serum of plasma. Langdurig contact tussen stolsel en serum resp. cellen en plasma vergroot de kans op interferenties. Wanneer men een serum separator tube of heparine separator tube afcentrifugeert komt de gel tussen serum resp. plasma en cellen te zitten waarmee uitwisseling van stoffen tussen beide zones uitgesloten is. Gebruikt men afnametubes zonder deze gel dan moet het serum/plasma overgegoten worden in een nieuwe droge buis of epje.
- Te lang en/of te hard centrifugeren veroorzaakt eveneens hemolyse: de richtlijnen voor serumcollectie bedragen 1000-1200 g gedurende 10-15 minuten. Hoe een centrifuge instellen? lees hier.
- Gebruik bij vogels en reptielen heparine-tubes aangezien EDTA hemolyse kan veroorzaken.[5]
Referenties
- ↑ Dimeski: Interference testing. Clin Biochem Rev 2008;29 Suppl 1:S43-8. PMID: 18852856.
- ↑ Akane et al.: Colorimetric determination of fructosamine in hemolytic samples for the postmortem diagnosis of diabetes mellitus. Nihon Hoigaku Zasshi 1991;45:367-74. PMID: 1811101.
- ↑ Greenson et al.: The effect of hemolysis on creatine kinase determination. Arch. Pathol. Lab. Med. 1989;113:184-5. PMID: 2916906.
- ↑ van der Woerd-de Lange et al.: Studies on the interference by haemoglobin in the determination of bilirubin. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983;21:437-43. PMID: 6619741.
- ↑ Muro et al.: Effects of lithium heparin and tripotassium EDTA on hematologic values of Hermann's tortoises (Testudo hermanni). J. Zoo Wildl. Med. 1998;29:40-4. PMID: 9638624.
- ↑ Diagnostic Samples From the Patient to the Laboratory; 4th Ed, 2009; Walter G. Guder et al.; ISBN 978-3-52732307-4
