Hémolyse
Inhoud
Définition
C’est la libération de constituants des globules sanguins dans le sérum ou plasma sanguin.
C’est visible après centrifugation par la coloration rosée à rouge du sérum ou plasma sanguin due à l’hémoglobine provenant des globules rouges. L’hémolyse affecte un grand nombre d’analyses.
De toutes les formes d'interférence l'hemolyse influence le plus grand nombre de paramètres.[1]
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| H-Index: L=12 R=23, aucun | H-Index: L=12 R=94, faible | H-Index: L=12 R=420, fort |
Mécanisme d’interférence
L’hémolyse peut causer aussi bien l’augmentation que la diminution du paramètre analysé.
Fuite de substances intracellulaires
Des composants érythrocytaires peuvent fortement influencer la concentration dans le sérum/plasma.
Interférence optique
Le spectre d’absorption d’hémoglobine montre son maximum à une longueur d’onde de 415 nm et entre 540 et 570 nm. L’augmentation ou diminution observée d’un résultat dépend de la méthode (longueur d’onde) par laquelle le paramètre est mesuré et sa concentration. Ceci se produit avec:
Interférence chimique, biochimique et immunologique
Des composants intracellulaires peuvent interférer avec la réaction de mesurage. Exemples sont :
- Fructosamine : faussement augmenté si on utilise la méthode NBT. [2]
- CK est faussement augmenté. [3]
- Bilirubine: l’effet peroxydatif suite à l’auto-oxydation d’hémoglobine casse la liaison diazobilirubine responsable de la réaction colorimétrique par laquelle le mesurage de bilirubine est légèrement ou fortement diminué. Ceci dépend de la composition du réactif diazo.[4]
Comment l’hémolyse est-elle détectée
A partir d’une concentration de 300 mg/L (0,3 g/L) d’hémoglobine l’hémolyse est visible à l’œil nu.
A chaque passage de l’échantillon dans l’analyseur biochimique une mesure bichromatique d’absorbance est effectuée dans l’échantillon après dilution avec de l’eau physiologique. Après mesurage à une longueur d’onde de 570 et de 600 nm, éventuellement corrigé par lipémie, un index d’hémolyse est calculé. Pour chaque paramètre effectué par l’instrument Il y a un indice H maximum défini pour lequel le mesurage est encore fiable. En cas de dépassement le résultat sera indiqué comme inexécutable.
Un tableau avec les indices H, L et I est consultable ici pour les méthodes appliquées par notre laboratoire pour un grand nombre de déterminations biochimiques.
Pour les échantillons qui ne passent pas par l’appareil biochimique, l’indice H n’est pas calculé et par conséquence l’hémolyse n’est pas indiquée automatiquement.
Une différence entre MCHC et CHCM de >1,9 g/dL dans un échantillon sanguin à l’EDTA est une indication de lipémie ou d’hémolyse. D’ou l’intérêt de vous donner les deux paramètres.
Peut on corriger les erreurs de mesure des paramètres testés suite à l’hémolyse?
non
Comment éviter l’hémolyse?
- Evitez la prise de sang difficile et la ponction multiple.
- Une surpression exagérée endommage les cellules aspirées et fait collapser les vaisseaux sanguins.
- Enlevez l’aiguille de la seringue avant le remplissage des tubes.
- Laissez couler prudemment le sang par le bord du tube.
- Tous les tubes sont à mélanger doucement. Ne pas mélanger ou mélanger faiblement cause des caillots ; trop mélanger cause l’hémolyse.
- Centrifuger et séparer le sérum et le plasma. Un contact prolongé entre caillot et sérum augmente les possibilités d’interférence. Quand un tube séparateur de sérum ou séparateur à héparine est centrifugé le gel se met entre le sérum le plasma et les globules en excluant l’échange de composants entre les deux zones. En cas d’utilisation de tubes sans gel le sérum/plasma est à transférer dans un nouveau tube sec ou microtube.
- Une centrifugation trop longue ou trop forte cause aussi l’hémolyse : Utilisez 1000-1200 g pendant 10-15 minutes.
- L’utilisation de tubes héparinés est recommandée pour les oiseaux et les reptiles étant donné que l’EDTA peut provoquer l’hémolyse.[5]
Références
- ↑ Dimeski: Interference testing. Clin Biochem Rev 2008;29 Suppl 1:S43-8. PMID: 18852856.
- ↑ Akane et al.: Colorimetric determination of fructosamine in hemolytic samples for the postmortem diagnosis of diabetes mellitus. Nihon Hoigaku Zasshi 1991;45:367-74. PMID: 1811101.
- ↑ Greenson et al.: The effect of hemolysis on creatine kinase determination. Arch. Pathol. Lab. Med. 1989;113:184-5. PMID: 2916906.
- ↑ van der Woerd-de Lange et al.: Studies on the interference by haemoglobin in the determination of bilirubin. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983;21:437-43. PMID: 6619741.
- ↑ Muro et al.: Effects of lithium heparin and tripotassium EDTA on hematologic values of Hermann's tortoises (Testudo hermanni). J. Zoo Wildl. Med. 1998;29:40-4. PMID: 9638624.
- ↑ Diagnostic Samples From the Patient to the Laboratory; 4th Ed, 2009; Walter G. Guder et al.; ISBN 978-3-52732307-4
