Volume d'échantillonage

A chaque test, un volume minimum est exigé. Le volume minimum exigé pour l’exécution d’une combinaison de tests n’est pas simplement la somme des volumes des tests individuels. Ca dépend du volume mort qui à son tour dépend de beaucoup de facteurs prévisibles ou non.

Comment calculer le volume requis?

Le volume d'échantillon requis et la somme

1. du volume ajouté au réactif
2. du volume mort cumulative de chaque mouvement de pipetage

Qu'est-ce que le volume mort?

Le volume mort est la quantité du liquide qui reste dans la pipette ou l'aiguille malgré une expulsion maximale, et dans le récipient dont est pipetté. Ceci dépend du récipient, la pointe et/ou l'analyser. Chaque mouvements de pipetage augmente le volume mort. La plupart des réactions requis qu'une fraction d'un millilitre (2-100 µL). Par contre le volume mort est facilement 100 à 200 µL.

Le volume totale requis n'est pas toujours facilement à prédire. Les tests de routine biochimiques sont exécutés sur la même machine dont le volume pour tous les tests demandés est pipité en une fois et reparti entre les différents mélanges de réactif. Mais si plusieurs machines ou modules de la même machine sont impliquées (en fonction du charge, type d'analyse,...) le volume mort multiplie.

Tests reflex et retest

Retest: Parfois il est nécessaire de refaire une analyse quand la première mesure était erronée ou trop hors normes, due par exemple à la présence d’un caillot ou de bulles d’air ou bien à d’ autres raisons qui ont entrainé un résultat non fiable.

Réflextest: parfois une deuxième analyse est effectuée automatiquement en cas ou la première a donné un résultat spécifique (par exemple détermination quantitative de glucose dans l’urine après mesure positive à la tigette).

Instructions générales

Sang

• Tenez compte qu’un échantillon sanguin produit pour la moitié du sérum ou plasma (si hématocrite de 50%). Les paramètres biochimique de routine peuvent être testés avec un volume de sérum de 0,5 mL (donc un volume de sang total de 1 ml) La détermination d’hormones, tests sérologiques, PCR et tests rapides demande considérablement plus de volume.
• Il n’y a pas de raison de remplir un tube glucose complètement. La seule analyse exécutable étant le glucose. 0,4 mL de sang est suffisant.
• Un tube EDTA avec 0,5 mL de sang est suffisant pour l’hématologie de routine (numération + formule) si vous utilisez un microtube !
• Un tube citrate doit être rempli jusqu’au marquage. Le citrate est un anti-coagulant liquide dont le ratio par rapport du sang est d’importance critique.
• Les tubes héparinés sont utiles pour les oiseaux et reptiles pour l’hématologie de routine et la biochimie.

Urine

• 1 mL d’urine est suffisant pour la biochimie qualitative (tigette), examen de sédimentation et éventuellement culture bactériologiques.
• La pureté de l’urine est souvent plus un problème que le volume.

Selles

• 1 g est suffisant pour l’examen parasitaire de selles.
• La méthode Baerman pour l’indiquation de nématodes pulmonaires exige 10 g de selle fraiche.
• Les selles molles contiennent plus d’eau et moins de matière dense. C’est pourquoi 2 g de selle molle et 4 g de selle aqueuse est le minimum recommandé.
• 1 g est égal à environ 1 cm³ ou une cuillère de thé.

Liquide de ponction

• Pour les tests biochimiques, un tube sérum contenant 0,4 mL de liquide est nécessaire.
• Remplissez un tube EDTA avec 0,4 mL minimum pour examen cytologique.
• Faire soi même un frottis sur une lame porte objet et laisser sécher à l’air (voyez vidéo).